Evaluación biológica de productos sanitarios. Pruebas de irritación cutánea aguda (Prueba de Draize para piel) (Acute Dermal Irritation) siguiendo las normas UNE-EN-ISO 10993-10: 2011 (Evaluación biológica de productos sanitarios. Parte 10: Pruebas de irritación y sensibilización cutánea). EPA (United States Environmental Protection Agency) 712-C-98-196. Prevention, Pesticides and Toxic Substances 7101. Health Effects Test Guidelines. OPPTS 870.2500: 1998; y Regulación del Consejo de Europa (EC) nº 440/2008 de 30 de mayo 2008, apartado B.4.

Acute dermal irritation test (Draize skin test) according to guideline UNE-EN-ISO 10993-10: 2011 (Biological evaluation of Medical Devices. Part 10: Tests for irritation and skin sensitization); EPA (United States Environmental Protection Agency) 712-C-98-196. Prevention, Pesticides and Toxic Substances 7101. Health Effects Test Guidelines. OPPTS 870.2500:1998; and European Council Regulation (EC) nº 440/2008, May 30 2008, part B.4.

Prueba de irritación cutánea aguda: el principio de esta prueba se basa en la aplicación de una dosis única a la piel de varios animales de experimentación, cada uno de los cuales sirve como su propio control (excepto cuando se sospecha una irritación/corrosión intensa). El grado de irritación se lee y determina a intervalos especificados y se describe completamente.

Prueba de irritación intracutánea aguda (intradérmica): La posibilidad de que un producto pueda provocar irritación cuando se introduce en un paciente/individuo, puede evaluarse a partir de la respuesta observada al inyectar un extracto del producto por vía intracutánea en animales de experimentación. Esta es una prueba genérica, y no excluye la necesidad de realizar otras pruebas más específicas en función del tipo de uso del producto, ya que los tejidos difieren en vascularización, composición, y respuesta. Por ello, la capacidad de irritación puede requerir ensayarse utilizando las mismas condiciones de contacto en la que vaya a ser utilizado el producto (por ej. pruebas de irritación ocular para productos de aplicación ocular). La norma UNE-EN ISO 10993-10, requiere utilizar tres animales de experimentación (conejos) a los que se les administrará, por vía intracutánea (intradérmica), el extracto del producto en cinco puntos distintos, así como otras tantas inoculaciones de control, utilizando los solventes utilizados para preparar los extractos del producto. Para preparar los extractos pueden utilizarse solventes polares (solución salina fisiológica, agua destilada, solución hidroalcohólica al 5%, polietilenglicol 400), o no polares (aceite vegetal), según las recomendaciones del fabricante del producto, en función de su composición química y/o solubilidad.

Comentarios generales: La apariencia de los lugares de inoculación, comparada con los lugares de inoculación de los controles debe observarse diariamente durante 3 días, asignándole una valoración cualitativa y cuantitativa (0 a 4), para describir y cuantificar el tipo de eritema o de edema, que pudieran aparecer. La duración del estudio debe ser lo suficiente para permitir una evaluación completa de la reversibilidad o irreversibilidad de los efectos observados y no necesita ser superior a los 14 días. En los casos que se solicite la exposición repetida, el periodo de observación será de un máximo de 21 días. No es necesario probar sustancias fuertemente ácidas o alcalinas (pH 2 o menos, o pH 11,5 o superior) ya que se predice su capacidad corrosiva. Tampoco es necesario probar sustancias muy tóxicas (LD50 menor de 200 mg/kg) o que hayan demostrado que no producen irritación cutánea al límite de la dosis de prueba de 2.000 mg/kg de peso corporal.

Cantidad de muestra necesaria para las pruebas

El volumen de líquido de extraído preparado con el producto sanitario (dispositivo médico) sometido a ensayo, para realizar las pruebas es de 10 mL.

Para calcular la cantidad de muestra necesaria para preparar ese volumen de extraído, siguiendo las directrices de la norma UNE-EN ISO 10993, se requieren las siguientes cantidades del producto sanitario:

  • Dispositivos médicos con superficies planas (guantes, láminas, tejido, etc.):
    • Superficie de un grosor < 0,5 mm, 6 cm2/mL.
    • Superficie de un grosor entre 0,5-1 mm: 3 cm2/mL.
    • Superficie de un grosor > 1 mm: 1,25 cm2/mL.
  • Dispositivos sólidos de forma irregular: 0,2 gramos/mL.
  • Dispositivos porosos irregulares: 0,1 gramos/mL.

Multiplique el tamaño de la superficie o el peso indicado, según corresponda, por el número total de mililitros indicado, y sabrá la cantidad en cm2 o gramos necesarios para el ensayo. 

Coste de las pruebas

Consultar a a ivami@ivami.com.

Acute skin irritation test: this test is performed by the application of one single dose onto the skin of several experimental animals, each one acting as their own control (except when severe irritation/corrosion is suspected). The degree of irritation is read and evaluated at specified intervals and is completely described.

Intracutaneous irritation test (intradermal): the probability that a product can induce irritation when introduced in a patient/subject, can be evaluated from the observed response observed when an extract from the product is inoculated intradermically into experimental animals. This a general test and do not exclude the requirement to perform other more specific tests according to the use of the product, because organic tissues differs in vascularization, structure, composition and response. For this reason, the irritation potential may require to be assayed using the same contact conditions as the product will be used (e. gr. ocular irritation for ocular applied products). Guideline UNE-EN ISO 10993-10, require to use three experimental animals (rabbits) to be exposed by intracutaneous route (intradermically) to the extract of the product in five different points, as well as the control inoculations with solvents used to obtain the extracts from the product. To obtain the extract from the product polar (physiological saline, distilled water, hydroalcoholic 5% solution, polyethylene glycol 400), or non-polar (vegetal oil) solvents can be used, according with the manufacturer recommendations due to chemical composition and/or solubility. 

Comments: the aspect of inoculation points, compared with those of the controls must be observed daily for 3 days, with a qualitative and quantitative qualification (0 to 4), to describe and quantify the grade of erythema or oedema that could be present. The duration of the test must be long enough to allow the complete evaluation of the reversibility or non-reversibility of the effects but not need to be longer than 14 days. In case, the repeated exposure had been asked, the observation period will be at least 21 days. It is not necessary to test deep acidic or alkaline substances (pH 2 or lower, or pH 11.5 or higher) because a corrosive action is predicted. Neither is necessary to tests substances highly toxic (LD50 lower than 200 mg/kg) or those that have shown that do not induce an irritation at the limit test dose of 2.000 mg/kg body weight. 

Sample needed for tests (general recommendations for all Biological evaluation tests with Medical Devices)

For those medical devices that had at least a flat non-rigid surface, that will be in contact with the skin (e. gr. gloves) the assay may be performed by direct contact without a previous extraction procedure. It is necessary to inform about the surface that will be in contact with the skin. In those cases 6 units are needed.

For other kind of devices, the volume of fluid extract obtained from the medical device under test, to perform the tests is 6 mL.

 

To calculate the sample quantity to obtain the volume of extract needed, according to guideline UNE-EN ISO 10993, the following amounts are needed:

  • Medical devices with flat surfaces (films, tissues, etc.):
    • Surfaces with thickness < 0.5 mm, 6 cm2/mL (e. gr. to obtain 6 mL, 36 cm2 will be needed).
    • Surfaces with thickness between 0.5 and 1 mm: 3 cm2/mL (e. gr. to obtain 6 mL, 18 cm2 will be needed).
    • Surfaces with thickness > 1 mm: 1.25 cm2/mL (e. gr. to obtain 6 mL,, 9 cm2 will be needed).
  • Solid devices with irregular shape: 0.2 grams/mL.
  • Solid porous irregular devices: 0.1 grams/mL.

Multiply the size of the surface or the weight, as correspond, by the number of total mL indicated, and you will know in square cm or grams needed for the assay. 

Formulary with the characteristics of the product

In case of test order, a submission formulary must be addressed with the sample including any data or characteristics (kind of material, composition, …) that should be included in the laboratory report. 

Time schedule for results    

Time required to perform the tests is about 15 days after the reception of the sample in our laboratory. If we have the results earlier we will let you know.

Price of the test

Consult: ivami@ivami.com