Evaluación biológica de productos sanitarios. Detección cuantitativa de endotoxinas (European Pharmacopoeia 2.6.14: Método E –Chromogenic end-point method): LAL (Limulus Amebocyte Lysate)-Prueba cromogénica QCL-1000

La prueba LAL (Limulus Amebocyte Lysate) cromogénica QCL-1000, se utiliza para detectar y cuantificar endotoxinas asociadas con bacterias gramnegativas, pero no detecta pirógenos relacionados con sustancias químicas. En la prueba QCL-1000, se utiliza un sustrato sintético equivalente al lisado de los amebocitos del cangrejo Limulus polyphemus, y se considera la más conveniente por: a) su sensibilidad elevada; b) los resultados de la prueba son  lineales con la concentración de endotoxina; c) esta prueba está reconocida por la FDA, y se recomienda para garantizar que los productos analizados no contienen endotoxinas (sustancias pirogénicas); d) en esta prueba, se utiliza un sustrato sintético unido a un cromógeno que facilita la lectura y cuantificación de la reacción; e) la utilización de cinco estándares por duplicado permite elaborar una recta patrón para cada ensayo, para cuantificar la cantidad de endotoxina presente en la muestra analizada.

Cantidad de muestra necesaria para las pruebas

El volumen de líquido de extraído preparado con el producto sanitario (dispositivo médico) sometido a ensayo, para realizar las pruebas es de 1 mL.

Para calcular la cantidad de muestra necesaria para preparar ese volumen de extraído, siguiendo las directrices de la norma UNE-EN ISO 10993, se requieren las siguientes cantidades del producto sanitario:

  • Dispositivos médicos con superficies planas (guantes, láminas, tejido, etc.):
      • Superficie de un grosor < 0,5 mm, 6 cm2/mL.
      • Superficie de un grosor entre 0,5-1 mm: 3 cm2/mL.
      • Superficie de un grosor > 1 mm: 1,25 cm2/mL.
  • Dispositivos sólidos de forma irregular: 0,2 gramos/mL.
  • Dispositivos porosos irregulares: 0,1 gramos/mL.

Multiplique el tamaño de la superficie o el peso indicado, según corresponda, por el número total de mililitros indicado, y sabrá la cantidad en cm2 o gramos necesarios para el ensayo. 

Coste de las pruebas

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