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Virus Dengue (serotipos 1 a 4) – Anticuerpos IgM e IgG; Diagnóstico molecular (RT-PCR); Identificación de serotipos (PCR y secuenciación)

 

Información 02-01-2013.

Este virus se está expandiendo a países donde previamente no se encontraba, y actualmente se considera la arbovirosis más importante que afecta a personas. Este virus se incluye entre el grupo de virus transmitidos por artrópodos (Arbovirus: Athropod Borne Virus), al ser trasmitidos principalmente por Aedes aegypti y Aedes albopictus. Pertenece al género Flavivirus de la familia Flaviviridae, con otros virus como el virus del Nilo Occidental –West Nile-, el virus de la Fiebre Amarilla –Yellow fever-, el virus de la Encefalitis Japonesa –Japanesse Encephalitis-, o el virus de la Encefalitis de Saint Luois –St Louis Encephalitis-.

Esta virosis, se considerada un problema ajeno, que sólo afectaba a personas que residían en zonas endémicas, o que viajaban a ellas, pero ha llegado a diagnosticarse en dos casos autóctonos en Niza (Francia) en 2010. Su extensión se debe a los cambios climáticos que han permitido una expansión de sus artrópodos vectores, a la expansión de Aedes aegypti en ambientes urbanos, a la expansión mundial de Aedes albopictus (como la ocurrida por el comercio de cubiertas usadas de ruedas de vehículos), y al aumento de viajes aéreos intercontinentales. Actualmente, se ha extendido a casi todas las zonas tropicales y subtropicales, afectando a más de 100 países de África, América, Mediterráneo Oriental, Asía y Pacífico Occidental.

En general, esta virosis se caracteriza por una enfermedad febril leve (fiebre del Dengue clásica), pero puede progresar a formas graves como la fiebre hemorrágica del Dengue (Dengue Hemorrhagic fever –DHF) y síndrome del shock por Dengue (Dengue Shock Syndrome –DSS-).

Para su diagnóstico existen varias posibilidades: 1) Aislamiento del virus; 2) Detección de antígeno; 3) Detección de anticuerpos; y 4) Amplificación de ARN viral.

De ellas, el aislamiento en cultivo es posible, y es el “Gold standard”, pero requiere tiempo y podemos realizarlo en IVAMI porque disponemos de instalaciones con cultivos celulares, e instalaciones de bioseguridad; pero no así en otros laboratorios que carecen de estas instalaciones, por lo que actualmente no se recomienda como procedimiento habitual.

La detección de antígeno se ha introducido para detectar la proteína no estructural NS1 (DENV NS1) en suero y muestras de necropsia postmortem de tejidos no fijados. Pero es útil en la etapa inicial de la infección, aunque no es muy sensible y es inhibida por la presencia de anticuerpos que secuestran el antígeno, como los que existen en las infecciones secundarias. Por ello, no es una opción recomendable, y no la realizamos en IVAMI,

La detección de anticuerpos siguiendo los métodos serológicos convencionales requiere las muestras de fase aguda y de fase de convalesciente, para poder detectar la seroconversión. En su lugar, podemos realizar la detección de anticuerpos IgM cuando se dispone de una muestra única. La realizamos en IVAMI, pero no permite diferenciar serotipos, por lo que también la desaconsejamos como método de diagnóstico general, si se quiere conocer el serotipo.

La amplificación de ARN viral mediante RT-PCR es un método que obvia los inconvenientes indicados para los otros procedimientos, ya que es un método rápido, sensible, que puede realizarse con muestras de suero y de tejidos, e incluso tejidos fijados e incluidos en parafina. Al mismo tiempo, permite no sólo la detección de la presencia del virus cuando se amplifica la región genómica NS5 y/o el gen C, sino además, diferenciar por amplificaciones de grupo o serotipo-específicas, cada uno de los cuatro serotipos de Dengue (DENV 1, 2, 3 ó 4). 

Pruebas realizadas en IVAMI:

Muestra recomendada:

Conservación y envío de la muestra:

Plazo de entrega:

Coste de la prueba: