ASTM E3135–18. Determinación de la eficacia antimicrobiana de la radiación ultravioleta germicida contra microorganismos en soportes con suciedad simulada
[Standard Practice for Determining Antimicrobial Efficacy of Ultraviolet Germicidal Irradiation Against Microorganisms on Carriers with simulated Soil].
Prueba acreditada por ENAC.
La norma ASTM E3135 define las condiciones de ensayo para evaluar los dispositivos de irradiación de luz ultravioleta germicida (bombillas de vapor de mercurio, diodos emisores de luz o lámparas de arco de xenón), que están diseñados para matar o inactivar microorganismos depositados en soportes inanimados.
Esta norma no recomienda ni microorganismos de ensayo ni condiciones de suciedad, sino que indica que el cliente debe seleccionar los microorganismos de ensayo y las condiciones de suciedad, si procede añadirlas, basándose en los objetivos específicos de la evaluación del rendimiento del dispositivo de irradiación UV antimicrobiano de ensayo. Como ejemplo, se mencionan dos agentes de suciedad, un agente de suciedad hidrófilo, la saliva artificial, y un agente hidrofóbico céreo, el sebo artificial, pero indica que deben elegirse condiciones de suciedad apropiadas para la aplicación real del dispositivo de irradiación. La norma ASTM E3135-18 también indica la posibilidad de realizar el ensayo sin sustancia interferente. Dependiendo del área de aplicación del dispositivo, el cliente puede solicitar el uso de otras sustancias interferentes de las indicadas por las normas EN o la guía BPR (por ejemplo, albúmina bovina 3 g/L; albúmina bovina 0,3 g/L; albúmina bovina 3 g/L + eritrocitos 3 mL/L; o albúmina bovina 10 g/L + extracto de levadura 10 g/L).
La prueba descrita por la norma ASTM E3135 se lleva a cabo en soportes de 2,5 cm de diámetro de cualquier material representativo del tipo de superficie al que irá destinado el dispositivo de irradiación UV en su uso real. Para la realización de la prueba se emplean 6 soportes por microorganismo de ensayo y condición de suciedad seleccionada (sin suciedad, con suciedad hidrófila, suciedad cérea u otras condiciones de suciedad indicadas por el cliente). Sobre cada soporte, se deposita el microorganismo de ensayo y, si procede, una vez seco el inóculo, el agente simulador de suciedad. De los 6 soportes, 3 soportes se expondrán a la fuente de luz ultravioleta de conformidad con las instrucciones de la etiqueta del dispositivo de irradiación y debe simular el uso real del mismo. Al mismo tiempo, los tres soportes restantes, empleados como control, son incubados a temperatura ambiente sin tratamiento UV. Al final del periodo de exposición, se extraen los microorganismos de los soportes y se cuantifica el número de microorganismos supervivientes existentes, mediante cultivo en medios apropiados para bacterias y hongos, o mediante titulación en cultivos celulares apropiados para virus. Con estos recuentos, se calcula el porcentaje de reducción para el microorganismo de ensayo debido al tratamiento UV bajo una condición de suciedad específica, al comparar la media de los microorganismos viables recuperados de los soportes control, no tratados, con la media de los microorganismos viables recuperados de los soportes tratados con luz UV.
En nuestro laboratorio, estos ensayos se realizan en una cámara de 74 m3. De forma general en IVAMI estos ensayos se realizarán en soportes de acero inoxidable, si el cliente desea realizar la prueba en otro tipo de soporte, para adecuarlo a las condiciones de uso de su dispositivo, puede consultarnos o proporcionarnos los soportes de ensayo. Habitualmente en nuestro laboratorio estas pruebas se realizan con las bacterias, levaduras, hongos y virus indicados. Si desean algunas otras especies no indicadas, puede consultarlo. El cliente debe indicar el procedimiento de irradiación a seguir con su producto (tiempo de irradiación, distancia de la fuente de UV a los soportes de ensayo, el ángulo relativo de exposición a la luz ultravioleta, y la posición de los soportes relativa a la longitud del dispositivo) y las condiciones del ensayo (microorganismos de ensayo, condiciones de suciedad a emplear, el material del que deben estar hechos los soportes de ensayo, temperatura inicial del ensayo, y rango de humedad relativa inicial). Debido al horario de nuestro laboratorio, el tiempo de irradiación de los ensayos deberá ser igual o inferior a 8 horas o igual o superior a 15 horas.