Instituto Valenciano de Microbiología
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Evaluación de la actividad bactericida con toallitas desinfectantes (Prueba de Toallitas Desinfectantes: Prueba de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa y Salmonella enterica). EPA SOP No. MB-09-07.

Prueba no acreditada en nuestro laboratorio.

Los organismos de prueba que se utilizan como obligatorios para determinar la actividad bactericida en esta prueba de toalla desinfectante son tres bacterias (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa y Salmonella enterica).

La densidad media geométrica para los portadores inoculados con S. aureus y P. aeruginosa debe estar entre 1,0 × 105 y 3,2 × 106, y la densidad media geométrica para los portadores inoculados con S. enterica debe oscilar entre 1,0 × 104 y 3,2 × 105.

Para realizar la prueba, se deben inocular 80 portadores de vidrio por microorganismo de ensayo: se requieren 60 portadores para la prueba, 6 para los conteos de portadores de control, 1-2 portadores para los controles de viabilidad y 1-2 portadores adicionales sin inocular para el control de esterilidad. El área de la paleta usada para limpiar se dobla y gira para exponer una nueva superficie de la paleta para cada transportador. Los juegos de 10 portadores inoculados (5 portadores por lado de la toallita) se limpian con la toallita probada deslizándose hacia adelante y hacia atrás tres veces a lo largo con la toallita para un total de seis pasadas a través del inóculo o según lo especificado por el cliente. Se puede solicitar la adición de un 5% de suelo orgánico al inóculo, dependiendo del uso previsto del producto. El método puede modificarse para adaptarse a varias combinaciones de paletas / soportes (por ejemplo, más de una paleta por juego de diez portaobjetos). El área de la toallita usada para limpiar se dobla y gira para exponer una nueva superficie de la toallita para cada portador. Se puede agregar una cantidad apropiada de carga orgánica, si es necesario. Una vez completado el tiempo de exposición, los portaobjetos se transfieren a tubos de subcultivo que contienen un neutralizador apropiado y todos los tubos de subcultivo se incuban durante 48 ± 2 horas a 36°C ± 1°C. Después del período de incubación, los resultados se registran como positivos (si hay crecimiento) o 0 (en ausencia de crecimiento), según lo determinado por la presencia o ausencia de turbidez.

La identidad de los microorganismos en al menos tres conjuntos de portadores positivos debe confirmarse por prueba. Si hay menos de tres portadores positivos, se debe confirmar cada portador. Las pruebas de confirmación incluyen reacciones de tinción de Gram, morfología celular, características de las colonias en medios sólidos y otras características fenotípicas.