EN 14476-Actividad virucida frente a virus de la hepatitis B, utilizando como virus subrogado, virus Herpes suino tipo 1 (Pseudorrabia), siguiendo los métodos recomendados por la norma UNE-EN 14476: 2014 + A1: 2015. Desinfectantes químicos y antisépticos. Ensayo cuantitativo en suspensión para la evaluación de la actividad virucida en el área médica. Método de ensayo y requisitos (fase 2/etapa 1).

Prueba no acreditada en nuestro laboratorio (ver Nota 1, para prueba acreditada).

Prueba con el certificado de Buenas Prácticas de Laboratorio (BPLs). 

Nota: La prueba UNE-EN 14476, para actividad virucida general, requiere como obligatorio realizar el ensayo con las tres cepas virales siguientes: Poliovirus tipo 1, Adenovirus tipo 5 y Norovirus murino. Esto se debe a que estos virus son más resistentes a la acción de los desinfectantes y cuando un desinfectante es activo frente ellos puede considerarse efectivo frente a otros virus no probados. Si la prueba se realiza con otras especies / cepas (como por ejemplo, en este caso, virus de la hepatitis B), se puede certificar que la prueba muestra actividad frente a esta especie / cepa viral, pero no cumple con el requisito de la norma para ser considerado virucida general.

Para el virus de la Hepatitis B (VHB) no existe una línea celular para su replicación in vitro. Sin embargo, el uso de virus sustitutos con propiedades biofísicas y estructura genómica similares permite la evaluación de la eficacia virucida de los desinfectantes químicos en las pruebas de suspensión cuantitativa. El virus sustituto recomendado es el virus herpes suino tipo 1 (Pseudorrabia) que sí puede replicarse en cultivos celulares in vitro. Otro de los virus sustitutivos más recomendados es la hepatitis viral del pato, que se replica en cultivos primarios de células de hígado de embrión de pato (DEL). Sin embargo, dada la sensibilidad y la dificultad en la obtención de dichas células, en nuestro laboratorio y en varias publicaciones (entre ellas; WHO Technical Report, Series No. 924, 2004), se utiliza el virus herpes suino tipo 1 (Pseudorrabia). El método utilizado es el mismo indicado en la guía EN 14476.

Además, la nueva versión UNE-EN 14476: 2014 + A1: 2015, introduce la posibilidad de que el virus Vaccinia se pueda usar cuando se prueban desinfectantes contra virus con envoltura para el lavado higiénico de manos y el tratamiento higiénico de manos por fricción. Por lo tanto, como el virus de la hepatitis B (VHB) es un virus con envoltura, ofrecemos la prueba para la actividad de desinfectantes contra el virus de la hepatitis B utilizando el virus herpes suino tipo 1 (Pseudorrabia), o con el virus Vaccinia, cuando se prueben desinfectantes para lavado higiénico de manos o tratamiento higiénico de manos por fricción.

Las condiciones del ensayo son los siguientes: 1) Tratamiento higiénico de manos por fricción y lavado higiénico de manos, cuando se desee un espectro limitado –virus cubiertos-; temperatura de ensayo 20ºC; tiempo de contacto entre 30 y 120 segundos*; y condiciones limpias para el tratamiento higiénico de manos por fricción, o sucias para el lavado de manos; 2) Desinfección de instrumentos temperatura de ensayo 20C; tiempo de contacto no superior a 60 min*; condiciones limpias o sucias*; 3) Desinfección de superficies, temperatura de ensayo entre 4 y 30ºC*; tiempo de contacto de 5 minutos máximo, para superficies próximas a pacientes ó 60 minutos máximo para otras superficies*; condiciones limpias o sucias*. El producto debe ensayarse como mínimo a tres concentraciones incluyendo una en el intervalo activo y otra en el intervalo no activo (estas dos últimas concentraciones las elige el laboratorio que realiza la prueba ya que corresponden a los controles positivo y negativo, respectivamente). Para considerar al producto como virucida debe demostrarse una reducción logarítmica de 4 en la infectividad. (*: el solicitante de la prueba deberá elegir dentro de los rangos o alternativas indicadas, y hacerlo constar en el formulario de pruebas).

Nota 1: Para que la actividad frente a virus opcionales esté cubierta por la acreditación de ENAC, se requiere que las pruebas se realicen también con alguno de los virus obligados por la norma (Poliovirus tipo 1, Adenovirus tipo 5 o Norovirus murino).