ASTM E2946-Determinación de la eficacia de reducción de bacterias de formulaciones para lavados de manos de manipuladores de alimentos usando manos de adultos. ASTM E2946–13. [Standard Test Method for Determining the Bacteria-Reducing Effectiveness of Food-Handler Handwash Formulations Using Hands of Adults].

Prueba acreditada por ENAC.

Esta prueba está, específicamente, diseñada para evaluar la efectividad de los productos para  eliminar bacterias de manos de manipuladores de alimentos contaminadas experimentalmente en condiciones de carga orgánica moderada o alta, utilizando las manos de adultos. Para ello, las manos de un grupo de sujetos adultos (como mínimo ocho para cada combinación de sustancia de prueba que se desea analizar), que se hayan abstenido de usar cualquier producto que contenga agentes antimicrobianos durante al menos una semana antes de la prueba para lo cual el laboratorio les facilitará un kit de aseo personal, sin productos antimicrobianos, de cuidado de uso exclusivo durante la prueba. Las manos son contaminadas con Escherichia coli   incorporado en un medio con carga orgánica interferente moderada, constituida con caldo de carne añadida a la suspensión bacteriana para simular las condiciones de carga orgánica, o de carga orgánica alta constituida por carne de hamburguesa, que luego se distribuye por todas las superficies de las manos y los dedos para dar lugar a una población mínima de recuperación inicial de ≥107 unidades formadoras de colonias (UFC)/mano.

El producto de prueba se evalúa, después de un único ciclo de contaminación/aplicación,  realizando previamente un lavado de manos completo para eliminar la grasa y la suciedad, secándose con papel completamente limpio. Posteriormente, se contaminan las manos con un caldo que contenga carga orgánica moderada o alta, según indicaciones del promotor de la prueba, y Escherichia coli. Las manos del sujeto se contaminan con la bacteria de prueba antes de la recuperación de referencia y antes de la aplicación del material de prueba. Las manos se muestrean para la recuperación inicial, inmediatamente después de la contaminación de la primera mano, posteriormente se realiza un lavado de limpieza, después de dicha recuperación inicial y antes de la contaminación de la segunda mano, se contaminan las manos y se aplica el material de prueba. La recuperación bacteriana se realiza después de los lavados con el control de referencia y con la sustancia de prueba,  colocando bolsas en la mano derecha e izquierda del sujeto y agregando solución de muestreo con neutralizador a cada una, pudiendo aspirar asépticamente un volumen conocido de muestra para proceder a la siembra.

La efectividad del material de prueba se determina comparando el número de bacterias recuperadas de las manos contaminadas después de una sola aplicación del material de prueba con el número recuperado de bacterias en manos contaminadas no expuestas al material de prueba. Los resultados obtenidos en los recuentos en placa (UFC / mano) se promedian y se  determinan los log10 de las reducciones en cada intervalo de recuperación / lavado, tal reducción significativa será evaluada con el método estadístico de Wilcoxon.

El cliente deberá indicar instrucciones de uso sobre el material de prueba a ensayar, como la concentración y las indicaciones sobre como agregar el producto. Así como, indicar si se desea incorporar sustancia interferente con moderada o alta carga orgánica. El solicitante de la prueba deberá de hacer constar estos requisitos en el formulario de prueba.