Prueba de toxicidad aguda sobre lombriz de tierra (Eisenia foetida) (Earthworm, Acute Toxicity test) (OECD 207: 1984)

Esta Norma incluye dos métodos: una prueba de toxicidad por contacto en papel y una prueba de toxicidad en tierra artificial. La especie de lombriz de tierra recomendada es Eisenia foetida, aunque la norma admite que se puedan emplear otras especies.

La prueba de contacto en papel de filtro es una prueba de detección inicial opcional que sirve para identificar sustancias químicas potencialmente tóxicas para las lombrices de tierra en el suelo, que deben complementarse con ensayos más detallados en tierra artificial. Esta prueba implica exponer a las lombrices de tierra a las sustancias evaluadas en papeles de filtro humedecidos colocados en viales donde se introduce una lombriz por vial. En este ensayo se debe usar una serie geométrica de al menos cinco o más concentraciones de tratamiento con el producto sometido a ensayo (expresados en mg/cm2) y, al menos, diez réplicas (con una lombriz por vial) para cada tratamiento, y los respectivos controles, es decir un mínimo de 60 pruebas (60 lombrices). Las pruebas se realizan en la oscuridad a 20 ± 2°C y durante un período de 48 horas tras el cual se evalúa la mortalidad. Además, la norma admite la evaluación de un tiempo de evaluación adicional de 72 horas.

La prueba en tierra artificial proporciona datos de toxicidad más representativos de la exposición natural de las lombrices a los productos químicos. Esta prueba implica mantener las lombrices de tierra en muestras de una tierra artificial definida con precisión que contenga la sustancia de prueba. Se debe emplear una serie geométrica de al menos cinco o más concentraciones de tratamiento (expresados en mg/Kg de peso seco) y, al menos, cuatro réplicas para cada tratamiento (mínimo 20 pruebas). Se debe usar una concentración que no provoque la mortalidad y otra que provoque una mortalidad total. Cada réplica implica el mantenimiento de grupos de 10 lombrices con tierra artificial en recipientes de cristal durante 14 días en continua luz a 20 ± 2°C (un mínimo de 280 lombrices, incluyendo los controles positivos, negativo y de solvente). La mortalidad se evalúa 7 y 14 días después de la aplicación.

Tras el ensayo, se informará de los datos de mortalidad, además de cualquier cambio fisiológico o conductual observado, y de la concentración letal media (LC50), definida como la concentración de la sustancia testada que mata el 50% de las lombrices durante el periodo de ensayo.

Para realizar las pruebas, debe proporcionarse al laboratorio la siguiente información: prueba a evaluar (contacto en papel o incorporación en tierra artificial), intervalo de concentraciones que se desee evaluar (deben elegirse un mínimo de 5 concentraciones para las cada una de las pruebas), naturaleza del producto y su solubilidad; si es no es soluble en agua, debe indicarse cuál es el solvente orgánico recomendado.