Ecotoxicidad – Daphnia magna: Prueba de inhibición de la movilidad (Norma ISO 6341: 2013 o Guía OECD 202: 2004).

En esta prueba se determina la toxicidad aguda para Daphnia magna que pueden tener sustancias químicas solubles o sustancias químicas que puedan mantenerse en una suspensión estable o en dispersión. Así mismo, puede realizarse con efluentes industriales o residuales, tratados o sin tratar después de su decantación, filtración o centrifugación, con aguas superficiales o con aguas subterráneas. La prueba determina la concentración que inmoviliza el 50% de los dáfnidos expuestos a la muestra de ensayo tras 24 horas y 48 horas, proporcionando los parámetros EC50-24 h y EC50-48 h (dependiendo de los requisitos de los usuarios o de las autoridades nacionales, puede requerirse uno u otro tiempo de exposición).

En el ensayo definitivo los dáfnidos se exponen a cinco concentraciones de ensayo, en 4 réplicas, para determinar el porcentaje de inhibición a cada concentración de ensayo y se calcula el EC50-24 h y EC50-48 h. De acuerdo con la norma EN ISO 6341, en el ensayo definitivo se deben incluir al menos 3 concentraciones con un porcentaje de inmovilización comprendido entre el 10 y el 90%, mientras que de acuerdo con la guía OECD 202, se debe incluir la concentración que causa la inmovilización del 0% y 100% de los dáfnidos. En la prueba se incluyen, además, controles positivos y negativos. Si el cliente no dispone de información de la toxicidad de la muestra para determinar las concentraciones del ensayo definitivo, puede solicitar la realización de un ensayo preliminar, con una réplica, donde los dáfnidos se exponen a una serie de concentraciones ampliamente espaciadas y se determina el rango de concentraciones sobre el cual se llevará a cabo el ensayo definitivo.

Las normas incluyen la posibilidad de realizar una prueba límite para realizar ensayos biológicos de sustancias químicas, empleando una única concentración de ensayo, 100 mg/L (o la máxima concentración a la que el producto sea soluble o forme una dispersión estable en agua). No obstante, si el resultado de este ensayo indica que el porcentaje de inmovilización es superior al 10%, debe realizarse la prueba completa. Durante las pruebas debe medirse la concentración de oxígeno disuelto y pH. Debe proporcionarse, de ser posible, el método para cuantificar la sustancia química a ensayar cuando se trate de ellas (coste no incluido en el coste de la prueba).

Para realizar las pruebas, debe proporcionarse al laboratorio la siguiente información: prueba a evaluar (prueba definitiva, prueba preliminar y definitiva o prueba límite), las concentraciones a ensayar (excepto cuando se solicite la prueba preliminar), la naturaleza del producto y su solubilidad. Las soluciones de prueba deben prepararse preferiblemente disolviendo la sustancia de ensayo en el agua. Debe evitarse el uso de otros disolventes, emulsionantes o dispersantes. Si se precisa el uso de un solvente diferente al agua, deberá realizarse un control adicional del solvente.