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Malassezia furfur y Malassezia spp.: examen microscópico, cultivo, detección por PCR e identificación de especie por secuenciación.

Información 09-12-14.

Malassezia spp. es un hongo oportunista, que puede encontrarse en individuos sanos, en los que formaría parte de la microflora cutánea, fundamentalmente en aquellos con piel grasa, para el que se admite su implicación en varios procesos cutáneos (por ejemplo Pytiriasis versicolor y folicultis). Además se considera muy probable su participación en otros procesos cutáneos, y es responsable de infecciones sistémicas en determinadas situaciones. Este hongo se diferenciaba previamente en dos especies, Pityrosporum orbiculare y Pirosporum ovale, según la morfología microscópica, y posteriormente estas dos especies se consideraron formas diferentes de una única especie: Malassezia furfur.

Hasta hace unos años sólo se admitían dos especies de Malassezia: Malassezia furfur, lipófila (dependiente para su cultivo de la presencia de grasas en el medio de cultivo), y Malassezia pachydermatis, no lipófila (sin necesidad de grasas en el medio de cultivo). Posteriormente el número de especies se fue incrementando, primero a 7 especies, posteriormente a 11, y actualmente se reconocen 13 especies: M. capraeM. dermatis, M. equine, M. furfur, M. globosa, M. nana, M. obtusa,  M. pachydermatis, M. restricta, M. slooffiae, M. sympodialis, M. japonica, y M. yamatoensis.

De las 13 especies actuales, todas son lipofílicas, excepto M. pachydermatis que puede desarrollarse en medios de cultivos exentos de grasas. El examen microscópico es muy útil en algunos tipos de lesiones donde se concentran las levaduras, o los seudomicelios en las escamas cutáneas (por ej. en la pitiriasis versicolor). El cultivo es lento, sobre todo para algunas de ellas, por lo que en IVAMI no lo recomendamos como método diagnóstico. De igual forma, la diferenciación fenotípica basada en los resultados de algunas pruebas bioquímico-metabólicas, es dificultoso y lento por las características especiales de este hongo.

 Actualmente se consideran las siguientes asociaciones patogénicas:

• Malasia furfur – Infección generalizada en neonatos hospitalizados con bajo peso al nacer, que reciben emulsiones lipídicas intravenosas; Psoriasis.
• Malassezia globosa – Pityriasis versicolor, que correspondería a la anterior especie Pityrosporum orbiculare, posteriormente considerado Malassezia furfur serovar. B.
• Malassezia restricta – Dermatitis seborreica y estados pitiriásicos (caspa), que correspondería a las anteriores especies Pityrosporum ovale y a Malassezia furfur serovar. C.
• Malassezia sympodialis – Dermatitis atópica.
• Malassezia pachydermatis – Rara implicación en infecciones humanas, a excepción de algunos brotes de sepsis. Su hospedador natural son los perros, pero se han encontrados estados de portador en personas con perros.

La implicación de otras especies en determinados procesos clínicos se encuentra en estudio, existiendo varias publicaciones que tratan de correlacionar alguna especie concreta, o más de una de ellas, en procesos como Psoriasis, Dermatitis seborreica infantil, Dermatitis atópicas, Foliculitis, Onicomicosis, Papilomatosis cutánea confluente reticulada, Pustulosis cefálica neonatal, Infecciones pulmonares en recién nacidos de bajo peso alimentaos con soluciones lipídicas intravenosas, cuadros de funguemias, … etc.

Pruebas realizadas en IVAMI:

• Examen microscópico, para visualizar las levaduras o seudomicelios en las escamas cutáneas.
• Cultivo en medios con requerimientos especiales: no recomendado por IVAMI por su lentitud.
• PCR para diana molecular ITS1.
• PCR para diana molecular ITS1, y secuenciación para identificación de especie.

Muestra recomendada:

• Lesiones cutáneas de Pitiriasis versicolor, Foliculitis, Dermatitis atópica, Psoriasis, ….: raspado de escamas cutáneas de la zona afectada, depositadas en recipiente de polipropileno de boca ancha con tapa de cierre hermético.

 Infecciones respiratorias del recién nacido (secreción respiratoria inferior): depositar 1 a 2 mL de muestra líquida en un tubo o en un recipiente estéril, preferiblemente de polipropileno para evitar la rotura, conteniendo 3 mL de un medio de transporte universal.

• Ingecciones sistémicas (fungemia) en recién nacidos, o pacientes, sometidos a nutrición parenteral con infusión de soluciones lipídicas: Muestra de sangre, obtenida en tubo con EDTA (10 mL).

Conservación y envío de la muestra:

 Refrigerada (preferido) durante menos de 2 días.
Congelada: más de 2 días.

Plazo de entrega:

• Examen microscópico: 24 horas.
• PCR para diana molecular ITS1: 48 horas.
• PCR para diana molecular ITS1, y secuenciación para identificación de especie: 72 a 96 horas.

Coste de la prueba:  

Consultar a ivami@ivami.com