Detección de Clostridium botulinum en casos de botulismo de heridas

                  Botulismo de heridas, producido por la infección de heridas con Clostridium botulinum y la elaboración de toxina in vivo después de crecer la bacteria en la herida. 

Pruebas disponibles y recomendadas 

• Prueba de cultivo, seguido de inoculación a ratones con filtrado de los cultivos.
• En caso de ser positiva, prueba de confirmación por neutralización e identificación del tipo de toxina.
• Recomendada: Prueba de cultivo, seguido de inoculación a ratones con filtrado de los cultivos.
• Opcional: En caso de obtenerse la presencia de toxina botulínica, identificación del tipo de toxina mediante PCR en tiempo real para cada uno de los genes productores de los distintos tipos toxina botulínica.

Muestras requeridas

• Exudado de heridas en los casos de sospecha de “botulismo de heridas”, para realizar el cultivo y detección de la toxina en el filtrado de los cultivos mediante inoculación a ratones. Si por las circunstancias del transporte de la muestra en aerobiosis pudiera haberse inactivado Clostridium botulinum, se podría proceder a realizar una prueba molecular para detectar la presencia de genes de Clostridium botulinum, y en caso de ser positiva, identificar el tipo mediante detección de los genes correspondientes de cada tipo de toxina. 

Tiempos de realización

• No podemos dar tiempos exactos. En caso de realizarse únicamente la detección de la toxina en los ratones y ser negativa, el informe estaría en un máximo de una semana. En caso de realizarse cultivo de la muestra, y posteriormente la detección de la toxina inoculando filtrados de cultivo a lotes de ratones, el tiempo sería de dos semanas. Si alguna de estas pruebas de inoculación a ratones, con extracto de una muestra o con el filtrado de cultivo de enriquecimiento, fuese positiva debe realizarse la prueba de neutralización en ratones para corroborar que se trata de la toxina botulínica e identificar su tipo por pruebas de neutralización, cuyo tiempo de realización es de 15 días.

• Las pruebas de PCR en tiempo real tienen un tiempo de realización de 3 ó 4 días laborables.

Condiciones de conservación y envío de las muestras

• Deben conservarse y enviarse en las condiciones en las que se encuentre habitualmente la muestra, protegida para el transporte. En el caso de muestras que puedan descomponerse por estar contaminadas con bacterias, o por su propia naturaleza orgánica (alimentos perecederos, etc.), las muestras deben conservarse y enviarse congeladas, o al menos en las condiciones que garanticen la refrigeración durante el transporte (envase con la muestra en el interior de una caja de poliestireno expandido –corcho blanco- con acumuladores de frío congelados –packs congelados-). Nota: este microorganismo no supone un riesgo biológico de contaminación por exposición.

Formulario con características del producto y prueba/s elegidas

• En caso de solicitar la realización de las pruebas debe remitirnos con el producto el formulario específico de petición que le hayamos adjuntado en el que se indicarán las características del producto y las pruebas elegidas que deseen que se realicen con la muestra remitida.