Método de ensayo cuantitativo para la evaluación de la actividad bactericida, levuricida, fungicida, tuberculicida y/o micobactericida en superficies no porosas empleando acción mecánica con toallitas en el área médica (4 campos de ensayo). Método de ensayo y requisitos (fase 2, etapa 2) (Norma EN 16615: 2026).
Prueba acreditada por ENAC, para los microorganismos indicados por la norma y para microorganismos adicionales, y bajo condiciones de la guía BPR para productos PT2, PT3 y PT4, y para los cuatro virus indicados bajo procedimiento interno.
Prueba con el certificado de Buenas prácticas de laboratorio (BPLs).
Esta es una prueba de portador para saber si un desinfectante químico para uso en superficies aplicado con toallitas muestra actividad bactericida, levaduricida, fungicida, tuberculicida y/o micobactericida. El producto de prueba debe proporcionar una mezcla homogénea, físicamente estable cuando se diluye en agua dura, o con agua destilada para productos listos para usar. El producto se usa en superficies no porosas donde la desinfección está médicamente indicada, incluyendo hospitales, centros médicos comunitarios e instituciones dentales, clínicas de escuelas y jardines de infancia y residencias de ancianos, y puede darse también en el lugar de trabajo y en el hogar. La superficie de prueba se marca con 4 cuadrados en una fila en la superficie de prueba y el campo de prueba 1 se inocula con la suspensión de prueba del microorganismo de prueba y el inóculo se deja secar. Se empapa una toallita con 16 ml del producto de prueba a la concentración solicitada durante 30 minutos (se permiten otros volúmenes y tiempos de remojo con desviaciones) o se usa una toallita preimpregnada. La superficie de prueba se limpia con la toallita empapada a través de los cuatro campos de prueba marcados y se vuelve a limpiar hasta el punto de inicio. La superficie de prueba se mantiene a la temperatura y durante el tiempo de contacto solicitado por el cliente. Los microorganismos, la temperatura, la suciedad y los tiempos de contacto se emplean según lo solicitado por el fabricante. Para la actividad bactericida, la prueba debe incluir Staphylococcus aureus, Enterococcus hirae y Pseudomonas aeruginosa; para la actividad levaduricida, Candida albicans; para la actividad fungicida, Candida albicans y Aspergillus brasiliensis; para la actividad tuberculicida, Mycobacterium terrae; y para la actividad micobactericida, Mycobacterium terrae y Mycobacterium avium.
La temperatura de prueba debe seleccionarse entre 4ºC y 30ºC (en el rango de 21,5 ± 3,5ºC para pruebas realizadas a temperatura ambiente). El tiempo de contacto debe ser de al menos 1 minuto y no superior a 60 minutos (de 1 a 5 minutos en intervalos de 1 minuto y de 5 a 60 minutos en intervalos de 5 minutos). La sustancia interferente para condiciones limpias es 0,3 g/L de albúmina bovina, y para condiciones sucias es 3 g/L de albúmina bovina más 3,0 mL/L de eritrocitos.
Paralelamente a la prueba, se realiza una prueba de control de agua con una toallita empapada en agua dura para asegurarse que los microorganismos de ensayo se esparcen por los cuatro campos de prueba, junto con dos controles de secado (después del secado del inóculo y después del tiempo de contacto). Al final del tiempo de contacto, los microorganismos de prueba se recuperan de cada campo de prueba, se determina el número de microorganismos de prueba supervivientes en cada muestra y se calcula la reducción comparando los resultados del control de secado después del tiempo de contacto y los resultados obtenidos con el producto. Para mostrar actividad bactericida, el producto debe demostrar una reducción de 5 log en el campo de prueba 1 y un promedio ≤ 50 UFC en los campos de prueba 2 a 4 para cada bacteria de prueba; y para actividad levaduricida, fungicida, tuberculicida y micobactericida, el producto debe demostrar una reducción de 4 log en el campo de prueba 1 y un promedio ≤50 UFC en los campos de prueba 2 a 4 para cada microorganismo de prueba. Para todas las afirmaciones, se debe realizar un mínimo de 2 ensayos. Un primer ensayo con 2 concentraciones para incluir una concentración en el rango activo y una concentración en el rango no activo. Para toallitas preimpregnadas o listas para usar que no se pueden diluir, la primera prueba debe realizarse con dos tiempos de contacto donde el rango inactivo debe mostrarse con un tiempo de contacto más corto. Si para el producto de ensayo se selecciona el tiempo de contacto más corto, 1 minuto; además, se debe probar el tiempo de contacto de 5 minutos. En la segunda prueba, se debe seleccionar el organismo de prueba más resistente de cada declaración y probarlo en dos soportes con una sola concentración activa o tiempo de contacto activo.
Para realizar la prueba se podrán enviar toallitas listas para su uso o productos líquidos desinfectantes cuya aplicación requiera una acción mecánica. Para una prueba básica (dos concentraciones o dos tiempos para productos preimpregnadas, una temperatura de prueba y unas condiciones de suciedad seleccionadas) para determinar cada actividad, se requiere un mínimo de 20 toallitas o 400 ml de producto desinfectante líquido. Siempre se recomienda enviar una mayor cantidad de muestras en caso de que sea necesario confirmar un resultado.