ASTM E1052-20. Método de prueba estándar para evaluar la actividad de los microbicidas contra virus en suspensión. [Standard Test Method to Asses the Activity of Microbicides against Viruses in Suspension].
Prueba acreditada por ENAC.
Este ensayo está destinado a demostrar la actividad viricida de sustancias de prueba con virus en suspensión. Para realizar la prueba, se añade una parte de la suspensión de virus a nueve partes de la sustancia de prueba, la mezcla se mantiene a la temperatura deseada (generalmente 22 ± 2ºC) durante el tiempo de contacto requerido y luego se analiza para detectar virus viables en un cultivo celular apropiado. El nivel de inactivación viral se calcula comparando el título viral con los obtenidos del control, donde se añade una parte de la suspensión del virus a nueve partes de tampón inofensivo para el virus. Se puede añadir a la prueba una carga de sustancia interferente, como suero fetal bovino en una concentración final del 5% o una mezcla de triptona, BSA y mucina. El producto debe probarse al menos en tres concentraciones incluyendo una en el rango activo y otra en el rango no activo (estas dos últimas concentraciones son elegidas por el laboratorio que realiza la prueba ya que corresponden a los controles positivo y negativo, respectivamente). En cada prueba también se deben incluir controles de cultivo celular, citotoxicidad y susceptibilidad viral. Para realizar un ensayo completo y más riguroso en nuestro laboratorio se utilizan los controles indicados por la norma ASTM E1052 y por la norma EN 14476. Para considerar el producto virucida se debe demostrar una reducción logarítmica de 4 en la infectividad del virus.
La norma ASTM E1052 no establece un virus de prueba obligatorio, sino que sugiere los siguientes virus de prueba: Adenovirus tipo 2 o tipo 5, Parvovirus canino, Citomegalovirus, Calicivirus felino, Virus de la hepatitis A, Herpes simple, Norovirus murino, Virus sincitial respiratorio, Rinovirus, Rotavirus o vacuna.