European Pharmacopoeia 11.0. Apartado 5.1.11.Determinación de la actividad bactericida, fungicida o levuricida de productos medicamentos antisépticos.
Prueba acreditada por ENAC.
Prueba con el Certificado de Buenas Prácticas de Laboratorio (BPLs).
Esta sección de la Farmacopea describe una prueba en suspensión que puede usarse para la determinación de la actividad antimicrobiana en medicamentos antisépticos miscibles con agua y destinados a la administración por contacto directo con la piel o membranas mucosas. El alcance de las pruebas depende de la actividad antimicrobiana declarada del producto. La prueba determina si un producto exhibe actividad bactericida, levuricida y/o fungicida.
Para evaluar la actividad bactericida se emplean las cepas de bacterias Staphylococcus aureus, Enterococcus hirae, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa, para la actividad levuricida Candida albicans y, para la actividad fungicida, Candida albicans y Aspergillus brasiliensis. Las cepas de ensayo se mezclan con el producto, a la concentración solicitada por el cliente y con la sustancia interferente indicada (3g/L de albúmina bovina, para una concentración final en el ensayo de 0,3 g/L de albúmina bovina) y se mantienen a 33°C se mantienen durante 5 minutos para la actividad bactericida y 15 minutos para la actividad levuricida o fungicida. De acuerdo con la farmacopea, se pueden elegir tiempos de contacto adicionales, de acuerdo con el uso indicado del medicamento antiséptico.
Para considerar al producto bactericida debe demostrarse una reducción logarítmica de la menos 5 en el número de unidades formadoras de colonias (UFC). Para considerar al producto levuricida o fungicida debe demostrarse una reducción logarítmica de al menos 4 en el número de células viables en el número de unidades formadoras de colonias (UFC).
El procedimiento puede realizarse por el método de dilución-neutralización o por el método de filtración. La concentración de la solución de prueba del producto antiséptico será, si es posible, 1,25 veces la concentración de prueba en uso porque se diluye al 80 % durante la prueba y la validación del método. Por lo tanto, la concentración máxima del ensayo, cuando se emplea puro (100%), es del 80% debido a la dilución que sufre en la mezcla de ensayo.