Ciguatoxinas (CTX)-Ciguatera: Prueba de bioensayo en ratón
Versión 08-08-2013.
Las ciguatoxinas, un conjunto de biotoxinas marinas liposolubles, son producidas por unas algas unicelulares, que son concentradas a través de una cadena alimentaria en peces. La ingestión humana de peces portadores, aparentemente sanos, provoca la intoxicación denominada ciguatera (ictiosarcotoxismo). Existen varios procedimientos para detectar la presencia de ciguatoxinas, aunque ninguno de ellos reúne los requisitos de rapidez y simplicidad, requeridos para una detección rápida. Los principales métodos utilizados son: a) métodos de bioensayo in vivo, utilizando diferentes animales como ratones, gatos, pollos, mangostas, mosquitos, gambas, larvas de mosca, ….., que consisten en alimentar o inocular con extractos concentrados preparados a partir de la carne de peces; b) método LC-MS (cromatografía líquida-espectrometría de masas, con distintas variantes; c) otros métodos: inmunológicos (radioinmunoensayo, ELISAs de varios formatos); fijación a canales de sodio celulares con cultivos de células de neuroblastoma; pruebas con tejidos aislados (aurícula de cobayo, nervio aislados, hemólisis de eritrocitos), etc. Cada uno de estos métodos tiene sus ventajas e inconvenientes en cuanto a rapidez, sensibilidad, o tipos de toxinas detectadas diferenciadas.
En nuestro laboratorio realizamos el método de bioensayo en ratón, inoculando varios lotes de cinco ratones con un extracto concentrado. Este método tiene el inconveniente de ser lento, ya que requiere preparar el extracto concentrado, la inoculación y observación posterior durante varios días, de los lotes de ratones inoculados con las distintas diluciones del extracto, para poder calcular la dosis letal 50%.