Genotoxicidad del agua y aguas residuales utilizando la prueba umu (ISO 13829: 2000-Water quality — Determination of the genotoxicity of water and waste water using the umu-test).

 

Esta norma especifica el procedimiento para determinar la genotoxicidad de agua utilizado la prueba umu. El ensayo está basado en la detección de la genotoxicidad mediante el incremento de la expresión del sistema SOS, asociado al gen umuC.

En esta prueba el organismo de prueba se expone al producto evaluado con y sin un sistema activador metabólico utilizando microplacas. Después de 4 horas de incubación la inducción del gen umuC se compara con la activación espontánea de los cultivos de control no expuestos al producto. En la prueba se utiliza la bacteria modificada genéticamente Salmonella typhimurium TA1535/pSK1002. Esta bacteria es portadora del plásmido psK1002 que posee el gen umu-lacZ y un gen de resistencia a ampicilina que permite la selección de la bacteria por su resistencia a ampicilina.

La bacteria se expone en condiciones controladas a diferentes concentraciones del producto evaluado. La prueba está basada en la capacidad de los productos genotóxicos para inducir el gen umuC en la cepa de Salmonella en respuesta a las lesiones inducidas en el ADN. Sólo se requiere una sola cepa de bacteria por su capacidad de responder  a diferentes sustancias genotóxicas. La prueba debe realizarse en presencia y ausencia de activador S9.

La inducción del gen umuC es una medida del potencial genotóxico del producto evaluado. Este gen umuC está unido al gen lac-Z de β-galactosidasa y su inducción puede evaluarse mediante la determinación de la actividad β-galactosidasa.