Prueba de toxicidad aguda para peces de agua dulce con Brachidario rerio - Metodo estático (Fish acute toxicity test, ISO 7346-1; OECD 203: 1992).
 
Esta prueba puede realizarse ajustándose en las especificaciones a cualquiera de las siguientes directrices: ISO 7346-1: 1996; Procedimiento OECD 203: 1992; EPA-OPPTS-850-1075; RD 363/1995 de 10 de marzo anexo V; Directrices EU 92/69 EEC (O.J. L383 A).

Esta prueba determina el efecto tóxico de una sustancia para peces. Para ello se utiliza la especie Brachidario rerio (pez cebra) que se expone a la sustancia de ensayo durante 96 horas, registrándose la mortalidad a las 24, 48, 72 y 96 horas, y determinándose las concentraciones que matan al 50% (LD50: Lethal dose 50%). La prueba se puede realizar de dos formas: 1) Calculando la LD50, en cuyo caso se desarrolla en dos fases, una fase preliminar para determinar la concentración media letal aguda aproximada, y una segunda fase para determinar la concentración letal utilizando un rango de concentraciones ajustado, en función de los hallazgos de la fase preliminar; 2) Como alternativa, se puede determinar el efecto tóxico para los peces de una sustancia, sin llegar a determinar la concentración letal 50 (LD50), a unas concentraciones elegidas por el cliente. En la prueba se utilizan ejemplares de Brachidario rerio (pez cebra) de unos 30 mm que se aclimatan durante 7 días en el agua de dilución especialmente preparada para el ensayo con unas sales incorporadas, y en ella debe medirse a lo largo del ensayo diariamente, la concentración de oxígeno disuelto, la temperatura, y el pH. Las sustancias a probar se disuelven en el agua de dilución. Para las sustancias con baja solubilidad acuosa deben disolverse previamente con dispositivos de ultrasonidos o con solventes orgánicos de baja toxicidad para los peces, en cuyo caso deben incluirse los controles correspondientes de toxicidad de los solventes. En las pruebas para calcular la dosis letal 50% (LD50) se utilizan como mínimo 6 grupos con 3 peces en la primera fase preliminar para determinar el rango tóxico, y otros 6 grupos con al menos 7 peces en la segunda fase definitiva para calcular la concentración letal ajustada. Además, debe incluirse un control positivo con dicromato potásico ensayado con 7 peces, por lo que como mínimo se utilizan 67 peces. Cuando se ensayan sustancias de baja solubilidad se incluyen otros dos controles adicionales para incluir el ensayo de toxicidad del solvente utilizado (14 peces), lo que supone en este ensayo de toxicidad con productos de baja solubilidad un total 81 peces. En las pruebas para calcular la toxicidad de determinadas concentraciones concretas, el número de peces se reduce, al no tener que evaluar el rango de concentraciones tóxicas. Para realizar las pruebas, debe proporcionarse al laboratorio la siguiente información: intervalo de concentraciones que se desee evaluar, en el caso de  tener que calcular la LD50; concentraciones a probar en el caso de que únicamente se deseen probar concentraciones concretas (máximo 3 concentraciones); naturaleza del producto y su solubilidad; si es insoluble en agua, debe indicarse cuál es el solvente orgánico recomendado.

Coste de la prueba:

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