Hongos dermatofitos en muestras clínicas: examen microscópico; cultivo convencional; identificación de especie;  diagnóstico molecular (PCR).

 

Información 01-12-15.

 

El diagnóstico etiológico convencional de las dermatofitosis se ha realizado habitualmente mediante examen microscópico en muestras tratadas con KOH, o mediante cultivo de las muestras, con posterior identificación microscóipica de la especie de dermatofito. El examen microscópico puede dar resultados falsos positivos y falsos negativos y en algunas muestras como las procedentes de lesiones de onicomicosis, no puede diferenciar entre infecciones dermatofíticas y no-dermatofíticas. El diagnóstico definitivo convencional depende del aislamiento en cultivo, pero este método es poco sensible en los casos de onicomicosis y proporciona resultados tardíos.

Los métodos moleculares, como PCR son rápidos, sensibles y específicos. Se han utilizado varios métodos de PCR dirigidos a detectar el gen de la quitina-sintetasa I (CHS1) de los dermatofitos, que se han aplicado para identificar aislados de hongos en cultivo o para detectar su presencia en escamas de raspados cutáneos. Además, se ha evaluado un método de PCR anidada (nested) capaz de detectar cualquiera de los tres géneros (Trichophyton, Epidermophyton y Microsporum). Estos autores, al estudiar comparativamente muestras de onicomicosis mediante microscopía, cultivo, PCR simple y PCR anidada (nested), han obtenido el diagnóstico en 63%, 25%, 51% y 79% de los casos, respectivamente por los cuatro métodos comparados, por lo que es recomendable utilizar el método de la PCR anidada (nested) para el diagnóstico de onicomicosis.

El interés de aplicar la PCR anidada (nested) a las onicomicosis, reside en que aunque la mayoría de las onicomicosis fúngicas son producidas por dermatofitos, también pueden ser producidas por levaduras u otros hongos filamentosos no dermatofitos. Diferenciar estas etiología tiene interés porque difieren en su respuesta terapéutica, ya que los tratamientos antifúngicos no poseen la misma actividad frente a los distintos hongos productores de onicomicosis. Así por ejemplo, griseofulvina es efectiva únicamente frente a dermatofitos, y carece de activida frente a Candida spp., u otros hongos filamentosos no dermatofitos. Terbinafina posee actividad frente a dermatofitos, pero posee únicamente actividad  fungistática frente a Candida albicans

Pruebas realizadas en IVAMI:

 

  • Examen microscópico con KOH.
  • Culivo e identificación de especie mediante secuenciación.
  • Diagnóstico molecular (PCR) de dermatofitos de cualquiera de los tres géneros (Trichophyton, Epidermophyton o Microsporum) en muestras clínicas.

Muestra recomendada:

 

  • Muestras según el tipo de lesión: pelos o escamas en casos de tiñas del cuero cabelludo, escamas del borde de la lesión en casos de herpes circinados de piel lampiña o de eczemas marginados, fragmentos de uñas en casos de onicomicosis, etc.

Conservación y envío de la muestra:

 

  • Refrigerada (preferido) durante menos de 2 días.
  • Congelada: más de 2 días.

Coste de la prueba: