Opisthorchis spp. (O. viverrini, O. felineus) – Examen microscópico de huevos en heces; Diagnóstico molecular (PCR); Identificación de especies (secuenciación).

 

Opisthorchis es un género de platihelmintos trematodos, del orden Opisthorchiida,  familia Opisthorchiidae que afecta a las personas y a los mamíferos que se alimentan de peces de agua dulce (mamíferos piscívoros). Su infección puede conducir a un proceso carcinogénico, por lo que se han denominados trematodos carcinogénicos. El género Opisthorchis incluye las especies Opisthorchis viverrini, Opisthorchis felineus, Opisthorchis  gomtii, y Opisthorchis parasiluri. Desde el punto de vista de la medicina humana las especies más importantes son Opisthorchis viverrini y Opisthorchis felineus, que causan la opistorquiasis (una enfermedad similar a la  clonorquiasis por la infección de Clonorchis sinensis). La infección por este parásito, es endémica en el Sudeste Asiático, principalmente en Tailandia, República Democrática Popular de Laos, Camboya y Vietnam, y también en  Japón, China, y Taiwan.

En su fase adulta, este trematodo parásito tiene una forma oval típica de las duelas y alcanza hasta 1,5 cm de largo y 0,7 cm de ancho. Su cutícula no tiene espículas. Los huevos son ovales, de aproximadamente 20-30 μm de longitud y 15 μm de diámetro, de color marrón y operculados.

El ciclo biológico de Opisthorchis implica unos hospedadores definitivos donde se encuentran los helmintos adultos, sexualmente maduros, y dos hospedadores intermediarios (primero y segundo), generalmente caracoles acuáticos del género Bithynia y especies de peces de agua dulce, respectivamente. En el hospedador definitivo, cuando los helmintos adultos son maduros, expulsan los huevos a través de las heces y deben alcanzar el agua, donde llegan ya embrionados. Una vez en el agua son ingeridos por los caracoles (primer hospedador intermediario), en los que se desarrollan las fases de redias y después de cercarias inmaduras. Tras abandonar el caracol, las cercarias permanecen en el agua y son ingeridas por los peces, en los que se enquistan en el tejido conjuntivo o en los músculos, en forma de metacercarias.

La transmisión se produce a través de la ingestión de peces de agua dulce poco cocinados o ahumados que están infectados por la forma larvaria de metacercaria del parásito. Los peces que actúan como hospedadores intermediarios secundarios son peces de agua dulce, que a veces se encuentran es estuarios de los ríos, de la familia Ciprinidae (carpas) Cuando el hospedador definitivo ingiere peces infectados con metacercarias, éstas liberan la forma larvaria que parasita el hígado de las personas o de los animales que actúan como hospedadores definitivos, localizándose principalmente en los conductos biliares, hepáticos y pancreáticos, así como en la vesícula biliar, aunque algunas especies se localizan también en el tubo digestivo.

En los animales, la infección por Opisthorchis puede causar enteritis y diarrea, así como daños en el hígado y en el páncreas. En algunos casos, la infección transcurre sin desarrollar signos ni síntomas. Los casos graves suelen ser raros.

Las personas infectadas manifiestan unos síntomas generales que incluyen dispepsia, cansancio, dolor en el cuadrante abdominal superior derecho, incremento del tamaño de la vesícula biliar en exámenes de imagen. Debido a que los helmintos adultos se alojan en los conductos biliares del hígado, provoca inflamación y fibrosis de los tejidos colindantes. Cuando la infección es intensa y crónica, los pacientes presentan manifestaciones de algunos de los siguientes procesos: colangitis, coleecistitislitiasis biliar, fibrosis periportal, ictericia obstructiva,  o incluso desarrollan un cáncer biliar ductal (colangiocarcinoma). Este tipo de carcinoma es potencialmente mortal. Por esta razón, Opisthorchis viverrini está clasificada como un agente carcinógeno que puede causar carcinoma hepático. Debe pensarse en esta parasitosis en pacientes con sintomatología compatible residente en los países citados, o que hayan viajado a tales zonas y hayan consumido los peces comentados sin cocinar, o bien en pacientes autóctonos que hayan consumido estos peces importados sin cocinar.

 

Pruebas recomendadas para el diagnóstico:

 

El diagnóstico habitual está basado en la detección de huevos en las heces del hospedador definitivo (por ejemplo personas o animales). De los distintos métodos para detectar la presencia de huevos de helmintos en heces, el método de Kato-Katz es el método recomendado. Este método permite conocer la intensidad de la infección. Sin embargo es un método con escasa sensibilidad sobre todo en las infecciones ligeras. Este método tampoco permite diferenciar la infección por Opisthorchis viverrini, de la infección por otros tremátodos pequeños que eliminan huevos de tamaño y morfología similar (ovales y operculados), como es el caso de las infecciones por Clonorchis sinensis o Haplorchis taichui, por lo que únicamente puede informarse como huevos Opisthorchis-like. Este grupo de helmintos trematodos pequeños se conoce como MIF: Minute Intestinal Flukes). Para diferenciar los huevos de estas especies debe realizarse un método de concentración con formol-éter y a continuación teñir con yodo, permanganato potásico o azul de metileno. No obstante, debido a que los huevos se eliminan en las heces de forma intermitente, el examen microscópico en busca de huevos, puede dar resultados falsos negativos. Otro inconveniente del examen microscópico es que se requiere experiencia por parte del personal que realice las observaciones microscópicas. Una alternativa para poder conocer con certeza la especie infectante es observar los adultos. Para ello puede tratarse al paciente con praziquantel (tratamiento de elección), y administrar un laxante oral, que permita realizar un examen de las heces diarreicas en busca de los adultos.  

Además, puede detectarse su ADN en heces mediante métodos de diagnóstico molecular (PCR) e identificación de la especie mediante secuenciación. Las pruebas de PCR poseen elevada especificidad y sensibilidad en los casos de infecciones moderadas o intensas con más de 1.000 huevos por gramo de heces, pero la sensibilidad disminuye en las infecciones con menos de 1.000 huevos por gramo de heces.

Pruebas realizadas en IVAMI:

 

  • Examen microscópico de huevos en heces.
  • Diagnóstico molecular (PCR), para detectar ADN de Opisthorchis spp.
  • Identificación molecular de especie (secuenciación).

Muestra recomendada:

 

  • Heces.

 

Conservación y envío de la muestra:

 

  • Refrigerada (preferido) durante menos de 2 días.
  • Congelada: más de 2 días (sólo para diagnóstico molecular).

 

Plazo de entrega:

 

  • Examen microscópico de heces: 24 horas.
  • Diagnóstico molecular (PCR): 24 a 48 horas.
  • Identificación molecular de especies (secuenciación): 72 a 96 horas.

Coste de la prueba:

      Consultar a ivami@ivami.com