Staphylococcus aureus enterotoxigénico en alimentos - Cultivo; Diagnóstico molecular (PCR) de producción de enterotoxinas A (SEA), B (SEB), C (SEC), D (SED), E (SEE), G (SEG), H (SEH), I (SEI) y J (SEJ).

Staphylococcus aureus es una bacteria anaerobia facultativa Gram-positiva, con forma de coco, que se localiza con frecuencia en la piel y en la mucosa nasal y el tracto respiratorio de humanos y animales. La introducción de S. aureus en los alimentos procesados se debe, principalmente, a la contaminación aportada por los manipuladores de alimentos debido a la aplicación de prácticas inadecuadas de manipulación, que facilitarían la presencia y el desarrollo del agente patógeno en los alimentos. La intoxicación por estafilococos ocurre como resultado del consumo de alimentos que contienen cantidades suficientes de enterotoxinas.

 

S. aureus produce varios factores de virulencia, que incluyen enterotoxinas (SE), la toxina exfoliativa (ET), la toxina del síndrome de choque tóxico (TSST-1), la termonucleasa, hialuronidasa, hemolisinas,lipasas y coagulasa. Las enterotoxinas estafilocócicas (SE) se han clasificado en cinco tipos serológicos clásicos (SEA, SEB, SEC, SED y SEE). Se ha informado que estas SE clásicas son responsables del 95% de brotes de envenenamiento por estafilococos. Entre las enterotoxinas, la SEA es la causa más común de intoxicación alimentaria relacionada con estafilococos en todo el mundo, seguido de SED y SEB. Varias SE se designan como toxinas similares a las toxinas SE (SEl) porque carecen de propiedades eméticas o éstas aún no se han probado. Por lo tanto, hasta la fecha, se han reportado un total de 21 toxinas SE y toxinas SEl. Además de las cinco enterotoxinas estafilocócicas clásicas bien caracterizadas SEA, SEB, SEC, SED y SEE, se han reportado 16 nuevos tipos de SE (SEG, SEH, SEI, SER, SES, SET) y SEls (SElJ, SElK, SElL, SElM, SElN, SElO, SElP, SElQ, SElU y SEVL).

La distribución de genes que codifican enterotoxinas en las cepas de S. aureus son muy variables, con algunas regiones estables del cromosoma (por ejemplo, grupo de genes enterotoxigénicos-EGC) asociado con linajes particulares, y otros llevados a elementos genéticos móviles. Los elementos genéticos móviles son segmentos de ADN que codifican enzimas y otras proteínas que confieren su capacidad para moverse horizontalmente entre las células bacterianas. En S. aureus, los principales elementos genéticos móviles son bacteriófagos, islas de patogenicidad de S. aureus (SaPI), plásmidos, transposones y cromosomas de cassettes estafilocócicos (SCC). Se ha informado que todos ellos portan genes SE, excepto los SCC que generalmente portan genes de resistencia a antibióticos. La mayoría de los elementos genéticos móviles pueden moverse a alta frecuencia entre aislamientos de S. aureus, incluso durante el curso de la infección.

La detección de enterotoxinas de Staphylococcus aureus en un alimento (mediante inmunodifusión en gen, ELISA, ELFA…) requiere de complejidad instrumental, con subsecuente elevado coste, y el desarrollo metodológico inherente, con dificultades operativas. Por otra parte, la investigación de enterotoxinas de S.aureus en una cepa pura tiene un grado de dificultad considerable, aunque variable. Además, frecuentemente los niveles en que estas enterotoxinas son sintetizadas se encuentran por debajo de los limites de detección de las metodologías utilizadas (inmunoensayos en sus diferentes variantes) o su expresión se encuentra inhibida directamente por las condiciones del medio en el que se encuentra el microorganismo.

 

El empleo de técnicas de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha permitido superar estas dificultades, siendo una herramienta eficaz, sencilla, fiable, rápida y de bajo costo para establecer la presencia de genes de enterotoxinas en cepas de S. aureus. En IVAMI, realizamos una PCR múltiple para detectar simultáneamente los genes más conocidos de enterotoxinas de Staphylococcus aureus (los genes productores de las enterotoxinas SEA a SElF), simultáneamente, en cepas aisladas de alimentos vinculados a brotes de intoxicación alimentaria. Posteriormente, la secuenciación de los amplificados permite determinar el tipo de enterotoxina presente.

 

Pruebas realizadas en IVAMI:

 

  • Cultivo de enriquecimiento durante 24 horas.
  • Aislamiento de colonias en medio sólido.
  • Diagnístico molecular de producción de las enterotoxina de Staphylococcus aureus A (SEA), B (SEB), C (SEC), D (SED), E (SEE), G (SEG), H (SEH), I (SEI) y J (SEJ).

Muestra recomendada:

 

  • Alimentos supuestamente contaminados. Muestra de alimento: 25 a 100 g.

 

Conservación y envío de la muestra:

 

  • Refrigerada durante menos de 2 días y envío dentro de caja de corcho blanco con pack (frigolín) congelado. 

Plazo de entrega:

  • Cultivo de enriquecimiento, aislamiento de colonias y detección molecular: 72 a 96 horas (días laborables). 

Coste de la prueba:  

 

  • Cultivo de enriquecimiento, aislamiento de colonias y detección molecular del tipo de enterotoxina de Staphylococcus aureusConsultar a ivami@ivami.com