Pruebas de eficacia de conservantes – Challenge test.
Prueba acreditada por ENAC.
Prueba con el Certificado de Buenas Prácticas de Laboratorio (BPLs).
Evaluación de la protección antimicrobiana de un producto cosmético – Prueba de eficacia (Challenge test) de conservantes. Norma EN ISO 11930: 2019 + A1: 2022. Las pruebas de exposición tienen como fin determinar el poder de un conservante para evitar la contaminación bacteriana durante su uso, por lo que son pruebas obligadas para aquellos productos que pueden suponer un riesgo de infección para el usuario o un deterioro del producto. Para ello, en la prueba de exposición (“Challenge”), se realiza una contaminación artificial de la muestra con 5 microorganismos, a una concentración establecida en la norma. Los microorganismos utilizados en las pruebas de eficacia son Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans y Aspergillus brasiliensis. Al inocular el producto cosmético con aquellos microorganismos, y realizar el seguimiento a las 0 horas, 7, 14, y 28 días. Los microorganismos inoculados deben descender a lo largo del seguimiento, y deben alcanzar una reducción logarítmica determinada, para cumplir los criterios A o B establecidos. En el caso de Aspergillus brasiliensis, no debe sufrir un incremento a los 28 días.
Evaluación de la protección antimicrobiana de un producto cosmético – Prueba de eficacia (Challenge test) de conservantes según la European Pharmacopoeia (5.1.3. Efficacy of Antimicrobial Preservation). Las pruebas de exposición tienen como fin determinar el poder de un conservante para evitar la contaminación bacteriana durante su uso, por lo que son pruebas obligadas para aquellos productos que pueden suponer un riesgo de infección para el usuario o un deterioro del producto. Para ello, en la prueba de exposición (“Challenge”), se realiza una contaminación artificial hasta el nivel establecido por cada norma. Los microorganismos utilizados en las pruebas de eficacia son Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans y Aspergillus brasiliensis. La Farmacopea Europea permite utilizar otros microorganismos si se considera que pueden representar posibles contaminantes para el producto. Para ello, el producto cosmético se inocula con los microorganismos citados, y se realiza el seguimiento a las 0 horas y en distintos intervalos posteriores de tiempo, que varían según el tipo de producto, hasta la lectura final a los 28 días. Los microorganismos inoculados deben descender a lo largo del seguimiento, y deben alcanzar una reducción logarítmica determinada, para cumplir los criterios A o B establecidos en la Farmacopea Europea para cada tipo de producto (uso tópico, oral, oftálmico, etc.). El criterio A expresa la máxima eficacia recomendada que debe alcanzarse. En casos justificados, cuando el criterio A no se puede alcanzar, por razones de un incremento del riesgo de reacciones adversas, el criterio B puede ser suficiente (satisfactorio).
Diferencias entre prueba de eficacia de conservantes (Challenge Test) según norma EN ISO 11930 y Farmacopea europea (5.1.3. Efficacy of Antimicrobial Preservation):
EN ISO 11930 (antes NF T 75-611) |
Farmacopea Europea |
Microorganismos: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans y Aspergillus brasiliensis. |
Microorganismos: Staphylococcus aureus, Peudomonas aeruginosa, Candida albicans y Aspergillus brasiliensis. La norma aconseja incluir Escherichia coli para productos de uso oral, por lo que IVAMI incluirá esta cepa en este tipo de productos. También aconseja incluir Zygosaccharomyces rouxi para preparaciones orales con alto contenido de azúcar. Pueden además incluirse otras cepas, que puedan representar contaminantes para el preparado. |
Muestreos: Siempre 0 horas para todos los microorganismos y además 7 días para bacterias y levaduras, 14 días y 28 días para bacterias, levaduras y mohos. |
Muestreos: Siempre 0 horas para todos los microorganismos y además, dependiendo del tipo de preparado, se realizarán los siguientes muestreos: Para preparaciones para los oídos, nasales, cutáneas y para inhalación 2 días, 7 días, 14 días y 28 días, para bacterias, y a los 14 y 28 días para mohos y levaduras; Para preparados parenterales, oftálmicos intrauterinos y intramamarios, a las 6 horas, 24 horas, 7 días, 14 días y 28 días, para bacterias, y 7 días, 14 días y 28 días para mohos y levaduras; Para preparados orales, oromucosos y rectales 14 días y 28 días para bacterias, mohos y levaduras. |
Inóculo: bacterias: 105 UFC/mL; levaduras: 104 UFC/mL y mohos: 103 UFC/mL. |
Inóculo: 105 a 106 UFC/mL para todos los microorganismos. |
Criterios de evaluación: El criterio A considera que el producto está protegido frente a la proliferación microbiana que pueda presentar un riesgo potencial para el usuario. El criterio B considera que el producto esta protegido si el análisis de riesgos demuestra la existencia de elementos de control no relacionados con el producto, indicando que el riesgo microbiológico es tolerable. |
Criterios de evaluación: Los criterios de aceptación depende de los tipos de preparado del producto (parenterales, oftálmicos, orales tópicos…etc). El criterio A, expresa la eficacia que debe alcanzarse, pero el criterio B, puede ser suficiente (satisfactorio), cuando no se pueda alcanzar el A, por razones por ejemplo de incremento en el riesgo de reacciones adversas. |
Comentario de IVAMI: La norma EN ISO 11930, considera a todos los productos, sea cual fuere su uso, iguales respecto al nivel de protección que deben ofrecer y la farmacopea europea establece unos criterios de interpretación según el uso del preparado, por lo que para algunos preparados sería menos restrictiva, y para otros preparados más restrictiva. Desde este punto de vista es más restrictiva la norma europea.
Información importante: Debe realizarse antes de la realización de la prueba la detección y recuento de bacterias aerobias mesófilas y el recuento de levaduras y mohos según normas ISO 21149 e ISO 16212.
Prueba de eficacia de conservantes con otros microorganismos:
Podemos realizar la prueba con otros microrganismos distintos a los requeridos por la norma EN ISO 11930 o la Farmacopea Europea, como los indicados a continuación, requeridos ocasionalmente por algunos clientes, así como con tiempos de evaluación adicionales o con reinoculaciones:
- Corynebacterium acnes (Propionibacterium acnes).
- Burkholderia cepacia.
- Pseudomonas putida.
- Bacillus spp.
- Zygoccharomyces rouxii.